CN1597697A — 一种人的甲状旁腺素1－34肽相关肽－Pro－Pro－[Arg11]]hPTH(1－34)－Pro－Pro

USPTO Abstract

本发明提供了人甲状旁腺素1－34肽相关肽－Pro－Pro－[Arg 11 ]hPTH(1－34)－Pro－Pro，及其构建方法和生产工艺。本发明所述的人甲状旁腺素1－34肽相关肽－Pro－Pro－[Arg 11 ]hPTH(1－34)－Pro－Pro是一种前体肽，在机体内N端的两个脯氨酸残基会被切除，生成有生物活性的[Arg 11 ]hPTH(1－34)－Pro－Pro。本发明还提供了[Arg 11 ]hPTH(1－34)－Pro－Pro的产生方法。甲状旁腺素1－34肽相关肽的制备包含以下步骤：(a)在适合表达人甲状旁腺素1－34肽相关肽－Pro－Pro－[Arg 11 ]hPTH(1－34)－Pro－Pro的条件下，培养含有权利要求3所述重组质粒pED－4P－[Arg 11 ]hPTH(1－34)的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有Pro－Pro－[Arg 11 ]hPTH(1－34)－Pro－Pro肽片段的融合蛋白；(c)分离纯化出Pro－Pro－[Arg 11 ]hPTH(1－34)－Pro－Pro肽；(d)借助体内的二肽酶IV等酶将Pro－Pro－[Arg 11 ]hPTH(1－34)－Pro－Pro肽N端的两个脯氨酸残基切除，形成[Arg 11 ]hPTH(1－34)－Pro－Pro肽。本发明还提供了人甲状旁腺素1－34肽相关肽基因和氨基酸序列、载体和宿主细胞。本发明可高效简便地生产高纯度、高活力的人甲状旁腺素1－34肽相关肽。