CN104458669A — 一种筛选蛋白激酶a抑制剂高通量筛选方法
Assigned to China Pharmaceutical University · Expires 2015-03-25 · 11y expired
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本发明发现了一种筛选蛋白激酶A抑制剂高通量筛选方法，包括以下步骤：(1)蛋白激酶A抑制剂筛选模型的建立与优化：进行激酶浓度、温孵时间、底物浓度、ATP浓度实验；(2)阳性药验证模型可靠性：选用合适浓度的激酶，ATP Km，底物Km，激酶和底物每孔分别加入2μl，再按浓度梯度每孔加入4μl阳性药，加入2ul ATP开始反应，按优化时间室温孵育；每孔加入10μl终止液终止反应，室温孵育1小时后检测，分析数据得阳性药IC 50 ；(3)高通量筛选模型验证：按照上述步骤操作，使用Biomek NX P 自动化加样仪器和Multidrop自动分液器进行加样，计算Z…
USPTO Abstract
本发明发现了一种筛选蛋白激酶A抑制剂高通量筛选方法，包括以下步骤：(1)蛋白激酶A抑制剂筛选模型的建立与优化：进行激酶浓度、温孵时间、底物浓度、ATP浓度实验；(2)阳性药验证模型可靠性：选用合适浓度的激酶，ATP Km，底物Km，激酶和底物每孔分别加入2μl，再按浓度梯度每孔加入4μl阳性药，加入2ul ATP开始反应，按优化时间室温孵育；每孔加入10μl终止液终止反应，室温孵育1小时后检测，分析数据得阳性药IC 50 ；(3)高通量筛选模型验证：按照上述步骤操作，使用Biomek NX P 自动化加样仪器和Multidrop自动分液器进行加样，计算Z因子。本发明的优点主要有：1)简便快捷；2)灵敏度高；3)结果稳定可靠，重现性好，可用于高通量筛选。
Drugs covered by this patent
- Zykadia (ceritinib) · Novartis
Bibliographic data sourced from FDA Orange Book + USPTO public records. Plain-English summary generated by AI grounded in source text. Patent term extensions (PTR, SPC, pediatric) may shift the effective expiry. Not legal advice.
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